靈芝對(duì)實(shí)驗(yàn)性血栓形成及人體紅細(xì)胞 變形能力的影響 |
【 整理發(fā)布:王力野生靈芝網(wǎng) 】 【 發(fā)布日期:7/6/2011 】 瀏覽次數(shù):2160 |
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提要 口服靈芝浸膏具有抗大鼠血小板血栓形成與纖維蛋白血栓形成的作用,并提高人體中老化紅細(xì)胞的變形能力;對(duì)大鼠凝血酶原時(shí)間及白陶土部分凝血活酶均無影響。
關(guān)鍵詞 靈芝;血栓形成;紅細(xì)胞變形能力
本文用日本人工培植的靈芝(Ling Zhi,LZ,Ganoderma Lucidum,Fr.Karst)提取制成的浸膏研究實(shí)驗(yàn)性血栓形成及人體紅細(xì)胞變形能力等影響。
材料與方法
動(dòng)物
Wistar種大鼠,♂,由上海醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。
試劑
靈芝浸膏由日本和漢生藥研究所提供,為棕色粉末。
稱取5g靈芝干浸膏加入0.5%CMC溶液配制成5%混懸液,置80℃水浴振蕩4h,置4℃?zhèn)溆谩?nbsp;
靈芝CMC混懸液置80℃水浴中振蕩2h,離心,取上清,即為靈芝水溶液I。
按上法振蕩2h后,超聲波(40W,30s)處理,離心,取上清,即為靈芝水溶液Ⅱ。
氯化鈉注射液,pH7.2~7.4,上海長(zhǎng)征制藥廠產(chǎn)品。
少血漿全血均為新鮮,血型不拘,由上海市血液中心站提供。
儀器
DXC-300A紅細(xì)胞變形能力測(cè)定儀,上海醫(yī)科大學(xué)產(chǎn)品,DS-87A型血栓儀,江蘇省丹徒科技開發(fā)服務(wù)公司產(chǎn)品。
大鼠體內(nèi)血小板聚集
動(dòng)物動(dòng)脈血流中的血小板接觸絲線的粗糙面時(shí)會(huì)粘附聚集,形成血小板血栓。當(dāng)血小板的粘附聚集功能受到抑制時(shí),血栓重量就減輕。從血栓重量可測(cè)知血小板的粘附聚集功能。大鼠于實(shí)驗(yàn)前禁食12~14h,隨機(jī)分組,分別灌胃給藥2次,前后給藥間隔時(shí)間為1.5h,于第二次給藥后1.5h,戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉。取一根由三段聚乙烯管組成的套管,在中段的聚乙烯管內(nèi)放一根已稱重約5cm長(zhǎng)的手術(shù)絲線,用肝素NS充滿聚乙烯管,將套管的兩端分別插入左頸外靜脈和右頸總動(dòng)脈后,開啟血流形成體外側(cè)支循環(huán)。15min后終止血循環(huán),迅速取出絲線稱重,總重量減去絲線重量即為血栓濕重。對(duì)給藥組和對(duì)照組的血栓濕重進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,并以阿斯匹林作陽性對(duì)照。
實(shí)驗(yàn)性大鼠血栓形成(Chandler法)
用加硅油原料的聚乙烯塑料管,內(nèi)徑4mm,長(zhǎng)60mm,旋轉(zhuǎn)環(huán)半徑38mm,與水平面呈74°夾角,轉(zhuǎn)速18r/min,血液在環(huán)內(nèi)流速419mm/min,觀察15min,實(shí)驗(yàn)溫度37±0.1℃,動(dòng)態(tài)觀察血栓形成全過程。以離體血液在旋轉(zhuǎn)環(huán)內(nèi)模擬體內(nèi)血流狀態(tài),在流體效應(yīng)的作用下,促使環(huán)內(nèi)血小板聚集及激活凝血酶原,形成血小板與纖維蛋白血栓。給藥后觀察藥效。
本實(shí)驗(yàn)采用DS-87A型血栓儀,先由頸動(dòng)脈放血1ml,入硅油化的聚乙烯塑料管內(nèi),立即置于旋轉(zhuǎn)環(huán)內(nèi)模擬血流狀態(tài)。轉(zhuǎn)動(dòng)15min,傾出血栓,量其長(zhǎng)度及稱濕重。56℃烘干22h,稱干重。對(duì)給藥組和對(duì)照組的血栓干重進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,并以尿激酶作陽性對(duì)照。
人體紅細(xì)胞變形能力測(cè)定
紅細(xì)胞的變形能力可用IF值(Index of Filtration)表示。IF值愈小,紅細(xì)胞變形能力愈佳。
先將人少血漿全血置于33℃孵化36h,室溫中再放置48h,使紅細(xì)胞自然老化,IF明顯增大。再將老化的少血漿全血用NS清洗,離心,去除白細(xì)胞等,剩下的紅細(xì)胞用NS配成5%左右的壓積紅細(xì)胞NS混懸液,并測(cè)定紅細(xì)胞壓積(H)。
取上述5%紅細(xì)胞懸浮液分裝于試管內(nèi),每管10ml,供試驗(yàn)用。對(duì)照組加入800ul NS,給藥組按等體積加入不同濃度的靈芝Ⅰ或Ⅱ,15~30min內(nèi)分別測(cè)定對(duì)照組及各給藥組的IF值。如果IF值給藥組<對(duì)照組,說明該濃度藥液對(duì)老化的紅細(xì)胞具有恢復(fù)作用。
結(jié) 果
對(duì)實(shí)驗(yàn)性血栓形成的影響
與其他藥物比較,口服靈芝CMC混懸液500mg/kg×2具有抗大鼠體外側(cè)支循環(huán)中血小板聚集的作用(P<0.01),和抗大鼠血小板與纖維蛋白血栓形成作用(P<0.01)?诜100mg/kg×2對(duì)上述兩者均無作用,
對(duì)人體紅細(xì)胞變形能力的影響
靈芝溶液Ⅰ在紅細(xì)胞懸液的最終濃度大于10.0mg/ml對(duì)人體紅細(xì)胞變形具有顯著的恢復(fù)作用(P<0.01)。靈芝溶液Ⅱ在最終濃度2.0mg/ml時(shí)即顯示作用(P<0.05)故認(rèn)為靈芝提取液經(jīng)超聲波處理后能促進(jìn)有效成分的溶解
討 論
靈芝的臨床應(yīng)用范圍非常廣泛,曾報(bào)道其具有抗衰老作用,并能降低血壓及血漿甘油三酯。近年來國(guó)內(nèi)外已用于防治高血壓、冠心病及高血脂癥等,也用于腦血栓的防治。靈芝尚具有抑制血小板聚集,增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能,治療慢性肝炎、皮炎、多發(fā)性肌炎、慢性支氣管炎、支氣管哮喘,心律失常、克山病、精神衰弱、腫瘤等。腦血栓患者紅細(xì)胞變形指數(shù)與健康人的相比有明顯差異。本文工作除了證明靈芝的體外抗血栓作用外,并對(duì)其影響紅細(xì)胞變形能力也作了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果指出靈芝有抗血栓形成、提高紅細(xì)胞變形能力的作用,從而提供文獻(xiàn)報(bào)道中有關(guān)靈芝療效的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本研究表明靈芝對(duì)凝血功能并無影響。
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